عناصر مشابهة
دراسة خصائص أنزيم بولي أمين أوكسيديز المنقى جزئيا من نسيج دماغ الأغنام
| العنوان بلغة أخرى: | Study of the Characterization of Partial Purified Polyamine Oxidase From Sheep's Brain Tissue |
|---|---|
| المصدر: | مجلة التربية والعلم |
| الناشر: |
جامعة الموصل - كلية التربية
|
| المؤلف الرئيسي: | |
| مؤلفين آخرين: | |
| المجلد/العدد: | مج28, ع3 |
| محكمة: | نعم |
| الدولة: | العراق |
| التاريخ الميلادي: | 2019 |
| الصفحات: | 6 - 16 |
| DOI: | 10.33899/edusj.2019.162978 |
| ISSN: | 1812-125X |
| رقم MD: | 1201787 |
| نوع المحتوى: | بحوث ومقالات |
| اللغة: | Arabic |
| قواعد المعلومات: | EduSearch |
| مواضيع: | |
| رابط المحتوى: |
| المستخلص: | The study included partially purified of polyamine oxidase (PAO) from sheep's brain tissue by dialysis and ion exchange chromatography using DEAE-cellulose techniques. Tow isoenzymes (I, II) were obtained with specific activities 3.876 and 2.856 units/ mg of protein and purification folds 11, 8 times respectively compared with crude enzyme. The specific activity of PAO I was better than PAO II, thus we considered it for following studying. The optimal condition showed 100 μL volume of enzyme, pH=9, 40ͦ C, at incubation time 10 min. Some of properties of partially purified PAO enzyme were studied and the specificity was found to be superior to the base material, where it was given the highest activity when using spermidine. Using lineweaver_ Burk plot, the values of maximum velocity (Vmax) and Michaelis constant (Km) were found to be 0.145 Unit/ ml and 43.4 mM respectively, and potassiumion was the most activator ion to the enzyme arrived to 233.8%. The compounds (ammonium chloride, sodium fluoride, phenyl hydrazine, sodium azide and EDTA) showed a significant inhibitory effect on the activity of the enzyme (56.1%, 49.9%, 49.9%, 37.3% and 25%) respectively. تضمنت الدراسة تنقية جزئية لأنزيم بولي أمين أوكسيديز من نسيج دماغ الأغنام، باستعمال الفرز الغشائي وكروموتوغرافيا التبادل الأيوني باستعمال DEAE- سليلوز. وجد أن هناك متماثلين للأنزيم (I وII) وبفعالية نوعية 3.876 و2.856 وحدة أنزيمية/ ملغم بروتين على التوالي، وبعدد مرات تنقية 11 و8 مرة على التوالي مقارنة بالأنزيم الخام. نظرا للفعالية العالية للمتماثل الأول I، فقد كان محل دراستنا ففي دراسة الظروف المثلى للأنزيم، وجد انه بالحجم الأنزيمي 100 مايكروليتر أعطى أعلى فعالية، وعند أس هيدروجيني (pH) 9، ودرجة حرارة 40°م، وعند فترة تحضين 10 دقائق. تمت دراسة بعض خصائص أنزيم بولي أمين أوكسيديز المنقى جزئياً ووجد أن خصوصية الأنزيم تجاه مواد الأساس قد أعطت أعلى فعالية عند استعمال السبرمدين. باستعمال رسم لينويفر- بيرك، لوحظ أن السرعة القصوى (V max) التي يعمل بها الإنزيم وقيمة ثابت ميكيلس (Km) بلغت 0.145 وحدة أنزيمية/ مل و43.4 ملي مولار على التوالي، وأن أيون البوتاسيوم هو أكثر الأيونات تحفيزاً لفعالية الأنزيم، حيث أدت إلى تحفيز الأنزيم بمقدار 233.8%. أشارت النتائج إلى أن المركبات (كلوريد الأمونيوم وفلوريد الصوديوم وفينايل هيدرازين وأزيد الصوديوم وEDTA) اظهروا تأثيراً تثبيطياً واضحاً على فعالية الأنزيم وبنسبة (56.1% و49.9% و49.9% و37.6% و25%) على التوالي. |
|---|
